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(1)已知干扰素的氨基酸序列,则利用人工合成法获取目的基因较简单.目的基因还可以从cDNA文库获取,由于cDNA是由生物发育的某个时期的mRNA反转录产生,因此cDNA文库只含某种生物的部分基因.
(2)基因表达载体包括标记基因、启动子、终止子、目的基因、复制原点等.
(3)动物细胞培养的条件包括无菌、无毒的环境、营养、适宜的温度和pH、气体环境,提供气体中CO2的主要作用是维持培养液的pH.
(4)目的基因的检测一般利用DNA分子杂交技术检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因.
故答案为:
(1)人工合成法? cDNA是由生物发育的某个时期的mRNA反转录产生
(2)启动子?终止子?标记基因
(3)无菌、无毒的环境温度和pH?维持培养液的pH
(4)染色体的DNA
考点: 基因工程的原理及技术 专题: 分析: 基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等. 基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取;②基因表达载体的构建;③将目的基因导入受体细胞;④目的基因的检测与表达.其中,基因表达载体的构建是基因工程的核心.故选:B. 点评: 本题知识点简单,考查基因工程的相关知识,只要考生识记基因工程的操作步骤,明确基因表达载体的构建是其核心步骤即可正确答题,属于考纲识记层次的考查.
不可行。你的想法太简单,当然和你没有实际经验有关。
首先,你加的放射性物质是什么呢?[32P]的无机盐吧,如此标记DNA,整个基因组都被标记,不只是目的基因。你怎么获得纯化的标记的目的基因呢?
2、目的基因导入受体,说起来简单。但实际的过程并不是我们宏观上放取物品那么简单。先把整个过程考虑完你再考虑你的方案是否成立。
3、引入放射性同位素,以后的所有过程都涉及安全问题
4、教科书的方案很原始,而且转基因检测的通常不是DNA,而是其表达的蛋白,用的是western。如果检测整合的话,一般用PCR而不是southern。
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