γ-氨基丁酸（GABA）转运蛋白1（GAT1）1通过清除抑制性神经递质GABA从突触囊泡中释放出的抑制性神经递质GABA时，调节中枢神经系统的神经元激发。通过抑制GABA再摄取转运蛋白来提高突触裂口中的GABA水平，是治疗神经系统疾病的既定策略，例如癫痫。在这里，我们确定了与其临床使用的抑制剂tiagabine3中的全长野生型人Gat1的冷冻电子显微镜结构，其有序仅为60 kDa。我们的结构揭示了Tiagabine通过阻断GABA释放途径的细胞内门，从而将GAT1锁定在向内开启的构象中，从而抑制神经递质的摄取。我们的结果为Tiagabine对GAT1的混合型抑制提供了见解，Tiagabine是一种重要的抗惊厥药。通过我们的实验数据证实，它的药效学谱表明，在向外开放的构象中，黄颌骨与底物结合位点的初始结合，而我们的结构则在向内构型中降低了转运蛋白的药物与两步抑制机制一致。GAT1的结构提供了对这种重要的神经递质转运蛋白的生物学和药理学的关键见解，并为神经调节剂的合理设计提供了蓝图，并移动了在单粒子冷冻膜蛋白质的单粒子冷冻微镜拷贝中被认为可能的界限。
